吉布森组装技术（Gibson Assembly） 是一种高效的DNA片段无缝拼接方法，由Daniel Gibson团队于2009年开发。其核心特点是无需酶切位点，可在单次反应中实现多片段（通常5-6个）的精准组装，广泛应用于合成生物学和基因工程。 技术原理 1.三酶系统： -T5核酸外切酶：从5'端消化DNA，产生粘性末端 -DNA聚合酶：填补序列缺口（常用Phusion酶） -DNA连接酶：共价连接片段 2.同源臂设计： -片段末端需设计15-40 bp重叠序列（overlap）
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